Trypticase Soy Broth
5 ml provette ,
sterili Popsicle bastoni di legno sterilizzati e ricoperto
marcatura cera matita
per provette
asciugamani di carta
Bleach ( soluzione al 10 per cento )
becco Bunsen
Partite
ciclo inoculazione
Trypticase soy agar
piastre di Petri
Incubator
Frigorifero
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tubi campione di terreno
1 test vengono utilizzati per diluire campioni di terreno .
parte una provetta sterile tappato containg 5 ml di brodo nutriente Trypticase Soy . Scegli un bastone Popsicle sterile .
2 Utilizzare un bastone Popsicle sterile per la raccolta del suolo.
Andate fuori e raccogliere un campione piccolo terreno con la punta del bastone Popsicle , utilizzando una tecnica sterile , un metodo per assicurare il campione non è contaminato , e l'utente non è infetto .
3
Stappare la provetta e aggiungere il terreno al brodo di coltura in provetta . Mescolare il terreno nel brodo con il bastone Popsicle . Coprire la provetta con il tappo . Scrivere la posizione data di raccolta e di raccolta sul lato della provetta utilizzando la cera pennarello .
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Mettere la provetta in un rack provetta per circa 30 minuti per permettere al terreno di stabilirsi a il fondo .
Inocula Petri Dish
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Disinfettare la superficie di lavoro con la pulizia con il 10 per cento soluzione di candeggina e tovaglioli di carta .
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Ruotare la piastra di Petri in modo che il coperchio inferiore contenente l'agar è alto . Disegnare un T sul coperchio inferiore , con la traversa del T separatore verso il terzo superiore del coperchio e il gambo della T che divide i due terzi inferiori a metà.
7 Utilizzare un becco Bunsen alla fiamma anse di inoculazione .
Accendere e accendere il bruciatore Bunsen . Flame il ciclo inoculo sulla fiamma del bruciatore Bunsen.
8
Stappare la provetta e toccare il ciclo per lo strato superiore di liquido chiaro . Ritirare il ciclo e ri- coprire la provetta .
Il Metodo T - Streak
9 Fai una striscia a zig-zag oltre un terzo del piatto .
Utilizzare la traversa della T avete disegnato sul retro del coperchio inferiore come punto di riferimento . Toccare l' ansa su un lato dello spazio sopra la traversa T e disegnare la punta sulla superficie dell'agar in una linea a zigzag , che termina la linea sul lato opposto dello spazio .
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rimuovere l'anello di inoculo e chiudere la capsula di Petri . Fiamma l'ansa del becco Bunsen , e lasciarlo raffreddare brevemente. Aprire la capsula di Petri e toccare il circuito in un punto vicino alla fine della linea già disegnata dal loop . Effettuare un'altra linea a zigzag perpendicolarmente alla prima linea , che copre il primo spazio sotto la traversa T e da un lato del gambo .
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Rimuovere l'anello e chiudere la capsula di Petri . Fiamma l'ansa di nuovo , aprire la capsula di Petri , e toccare il ciclo leggermente raffreddato alla seconda linea vicino alla sua fine . Tracciare un'altra linea a zig-zag perpendicolare alla seconda linea nello spazio aperto rimanente sul piatto di Petri .
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Chiudere la capsula di Petri dopo aver ritirato il ciclo . Fiamma l'ansa e metterlo da parte . Spegnere il becco Bunsen .
Cultura secondario
13 Selezionare una singola colonia per isolare ulteriormente i batteri .
Mettere la capsula di Petri in termostato a 30 gradi per 48 ore . Toglietelo ed esaminare l'agar per la crescita di colonie batteriche . Scegliere una colonia che sembra uniforme e discreto in aspetto generale , l'indicazione che la colonia nata da un singolo batterio . Cerchio la posizione della colonia sul retro del coperchio inferiore con la matita marcatura .
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fiamma l'ansa da inoculo . Aprire la capsula di Petri e toccare leggermente raffreddato ciclo al centro della colonia .
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Ripetere i passaggi per fare un T - striscia su una nuova piastra di Petri con agar nel coperchio inferiore . Quando la striscia è fatta e la capsula di Petri è chiuso , scrivere la data e il terreno campionare l'inoculo è stato preso da sul lato inferiore del coperchio inferiore . Spegnere il becco Bunsen .
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Incubare la piastra di Petri a 30 gradi centigradi per 48 ore . Esaminare le colonie che sono cresciute in agar , alla ricerca di uniformità del colore , forma e consistenza . Ripetere la procedura di coltura secondaria se sono presenti colonie che si discostano sensibilmente in apparenza dagli altri , indicando che un singolo batterio non è stato isolato .
17 colonie identico aspetto indicano isolamento microbiologico .
refrigerare la piastra di agar che contiene le colonie apparentemente identiche su di esso , con l'uniformità di essere una buona indicazione che un solo batterio è stato isolato dal campione di suolo .
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eseguire altri test per l'identificazione del batterio isolato se lo si desidera , come le macchie grammi , esame microscopico e coltura su diversi tipi di agar .
Da:https://giardino.98905.com/garden-lawn/soil/1006006478.html